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超聲波細胞粉碎儀的常見問題

發布時間:2012-05-08   點擊次數:3134次

一、問:鏈霉菌超聲破碎的,用的方法條件是什么?

答:前處理一般就是配置成一定濃度的菌懸液。使用超聲波細胞粉碎儀進行超聲破碎時采用的具體條件是:

   1、取細菌的 24 h 培養液于 5 000 rmin  下離心 5 min 收集菌體.

   2、用 pH 7的 Na2HPO -NaH2PO  緩沖液洗滌 次,再用該緩沖液將菌體配成 1    的菌懸液.置于 40 mL 大塑料試管內.

   3、將大塑料試管置于冰浴中,采用超聲波破碎功率 200 W,12”探頭,破碎 30 s,間歇 30 S)

   4、破碎液于 12 000 rmin下高速冷凍離心 30 min,收集細胞碎片和上清液,超聲破菌流程與 上述基本一致,就是洗滌菌體也可以用預冷的生理鹽水或 pH8 的 TrisHCl,洗滌一次就可以。另外超聲劑量隨樣品量、菌體改變比較大,功率可以到 400600w,超 5s,停 5s,冰浴,要加終濃度 1 mM 的 PMSF。為確定合適的超聲強度和次數,有必要隨時鏡檢觀察菌體是否完全破碎。放線菌屬于原核生物系統進化樹上的(GC)摩爾百分含量(mol%)高的革蘭氏陽性菌分枝類群。在做大腸桿菌超聲時,采用的是 400W超聲波細胞粉碎儀,超55的方法,效果不錯,但是用在鏈霉菌上,似乎沒什么效果。會不會就是由于細胞壁組成差異造成的呢,因為大腸桿菌式屬于革蘭氏陰性菌的。

二、超聲波細胞碎儀結構上有啥特點?

超聲波細胞碎儀的主要特點有一下幾個方面:

  1、超聲波細胞碎儀可儲存5個控制模式。

  2、定時數字顯示,輸出能量由光條顯示,0100%連續可調,操作直觀方便。

  3、超聲波細胞碎儀工作方式有間斷和連續兩種選擇,間斷工作時,脈沖寬度和間斷時間可分別設定。

  4、工作時間可由數字定時器控制,達到預定時間自動轉變為待機狀態,定時范圍1min99min。

  5、手持式超聲波細胞碎儀可人為自由控制工作和截止時間,使用靈活方便,適用于少量樣品的處理工作。

文章由先歐超聲波細胞破碎儀提供


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